fa بررسی برخی عوامل موثر بر کارایی روش تزریق مستقیم ژن به زیگوت موش تزریق مستقیم ژن های نو ترکیب به داخل زیگوت، روش متداول در ایجاد تغییرات ژنتیکی در موش آزمایشگاهی است. در این تحقیق، سعی شده است روش ریز تزریقی (microinjection) در زیگوت موش اجرا و بهینه سازی گردد. بدین منظور، زیگوت ها در مرحله پیش هسته ها از موش های تیمار شده با هورمون های PMSG و hCG جمع آوری گردیدند. سپس، محلول حاوی cDNA هورمون رشد انسانی بداخل پیش هسته نر در زیگوت ها تزریق گردید و زیگوت ها تا مرحله 2 و 4 سلولی کشت داده شدند. لایه زونا پلوسیدا از جنین ها حذف و واکنش زنجیره ای پلیمراز (polymerase chain reaction- PCR). با استفاده از آغازگرهای اختصاصی cDNA هورمون رشد انسانی و ژن  - اکتین بر روی جنین ها انجام شد. در این مطالعه، نژادهای مختلف موش به لحاظ پاسخ به هورمون های گونادوتروپین و تحریک تخمک گذاری، تاثیر سوزن های تزریق با قطرهای مختلف و تاثیر محیط های کشت ساده و غنی در رسیدن زیگوت های تزریق شده به مرحله تقسیم بندی مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج این بررسی ها نشان داد 90% زیگوت های بدست آمده از زاده های نسل اول حاصل از آمیزش دو نژاد BALB/ c و NMRI، بعد از تزریق DNA، در محیط DMEM/ F12 به مرحله 2 سلولی می رسند. همچنین، محیط KSOM توقف در مرحله 2 سلولی را در این جنین ها نیز رفع می نماید 0 0 http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-109-286&slc_lang=fa&sid=1 مرتضی دلیری جوپاری مرتضی دلیری جوپاری 10031947532846002059 10031947532846002059 No رضا خیرخواهی اوغان رضا خیرخواهی اوغان 10031947532846002060 10031947532846002060 No علیرضا زمردی پور علیرضا زمردی پور 10031947532846002061 10031947532846002061 No