دانشگاه آزاد واحد علوم و تحقیقات
چکیده: (14 مشاهده)
باکتریهای فعال هسته یخ (Ice nucleation bacteria) از عواملی هستند که در ایجاد خسارت ناشی از سرمازدگی و یخزدگی در گیاهان حساس به سرما نقش مهمی دارند. ژنهای هسته یخ در باکتریها بهصورت یک ژن کروموزومی منفرد است که غالباً در زیرمجموعه ژنهای ina طبقهبندی میشوند و در بیان فنوتیپ تولید هسته یخ (INA+) نقش کلیدی دارند. یکی از راههای مقابله با سرمازدگی ایجاد تغییر در ساختار ژنتیکی ژن کدکننده پروتئینINA است. تکثیر ژن inaZ در باکتری Pseudomonas syringae با یک جفت آغازگر اختصاصی و واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) انجام شد. محصول PCR در وکتور pTG19-T کلون و به باکتریEscherichia coli K12 منتقل شد. جهت ارزیابی و مقایسه فرکانس هسته یخ E. coli نوترکیب از روش انجماد قطرهای استفاده شد. برای ایجاد جهش در ژن ina در باکتری Pseudomonas syringae از ماده (EMS)Ethyl methanesulfonate استفاده شد. برای تأیید جهش ایجاد شده، علاوه بر آنالیز PCR، باکتری جهش یافته فاقد ژن هسته یخ و واجد آن در باکتری وحشی، با آزمون انجماد قطرهای مقایسه شدند. نتایج بر اساس فرمول پایه تشکیل 50 درصد قطره انجماد در هر تیمار (T50) نسبت به شاهد آب مقطر استریل و باکتری وحشی E.coli فاقد هسته یخ زدگی تعیین شد. در کلیه تیمارهای مثبت، بسامد هسته یخ زدگی بین 4- تا 7- بسته به رقت سوسپانسیونها متغییر بود. مشاهدات نشان داد علاوه بر انتقال موفق ژن inaZ مولد هسته یخ از باکتری P. syringae بهE.coli، کلنیهای جهشیافته P. syringae بهدلیل فقدان ژن هسته یخ، کاندیدهای مناسبی برای ایجاد اثر رقابتی با باکتریهای INA+ محسوب شده که میتوانند با قدرت تکثیر مشابه باکتریهای وحشی روی گیاهان مستقر و مانع هسته یخ بیولوژیکی شوند و جایگزین مناسبی برای معدود باکتری کشهای گیاهی باشند.
شمارهی مقاله: 6
نوع مطالعه:
پژوهشی کامل |
موضوع مقاله:
ژنتیک گیاهی دریافت: 1403/11/6 | پذیرش: 1405/2/29