Mirderikvand R, Sohrabi S, Samiei K, Ghorbani A. Identification, isolation and characterization of defensin gene family in lentil (Lens culinaris L.). MGj 2018; 13 (1) :119-132
URL:
http://mg.genetics.ir/article-1-48-fa.html
میردریکوند رضا، سهرابی سید محسن، سمیعی کامران، قربانی علی. شناسایی، جداسازی و بررسی خصوصیات خانواده ژنی دیفنسین در گیاه عدس (Lens culinaris L.). فصلنامه علمی ژنتیک نوین. 1397; 13 (1) :119-132
URL: http://mg.genetics.ir/article-1-48-fa.html
گروه زراعت و اصلاح نباتات، واحد خرمآباد، دانشگاه آزاد اسلامی، خرمآباد، ایران
چکیده: (1733 مشاهده)
دیفنسینهای گیاهی، خانوادهای از پپتیدهای ضد میکروبی کاتیونی غنی از سیستئین هستند. این پپتیدها مولکولهایی کوچک با وزن مولکولی 5 تا 7 کیلودالتون هستند که دارای هشت اسید آمینه سیستئین محافظت شده بوده که در ایجاد پلهای دیسولفیدی نقش دارند. در مطالعه حاضر با استفاده از ابزارهای بیوانفورماتیکی، خانواده ژنی دیفنسین از گیاه عدس جداسازی و تعیین خصوصیت شد. به این منظور تمام توالیهای نوکلئوتیدی مربوط به ژنهای دیفنسین گیاهان دو لپهای (583 توالی) از بانک ژن دریافت شد. توالیهای دریافت شده، علیه کتابخانه EST گیاه عدس (9539 مورد EST) همردیف و نتایج حاصل با هم مخلوط و سر همبندی شدند. قطعات سرهم بندی شده (کانتیگها) و قطعات غیر سر همبندی شده (سینگلتونها) با استفاده از BLASTn، علیه پایگاه داده nr همردیف شدند. کانتیگها و سینگلتونهای حاصل، برای وجود چارچوب خوانش باز کامل، دمینهای عملکردی، سیگنال پپتید، محل تجمع سلولی، خصوصیات فیزیکوشیمیایی، فراوانی اسیدهای آمینه، فعالیت ضد میکروبی و الگوی بیان مورد بررسی بیشتر قرار گرفتند. در نهایت با استفاده از واکنش PCR توالی کدکننده کامل دیفنسینها تکثیر و به صورت آزمایشگاهی تأیید شد. نتایج، وجود 6 کانتیگ که حاوی چارچوبهای خوانش باز بهطول 222 تا 228 جفتباز بودند را مشخص کرد. توالی پروتئینی دیفنسینهای شناسایی شده، حاوی دمین عملکردی Knot1 (Gamma-thionin) بود. این دیفنسینها دارای سیگنال پپتید بودند و تجمع خارج سلولی داشتند. بهعلت فراوانی بالای اسیدهای آمینه آبگریز، دیفنسینهای شناسایی شده آبگریز بوده و ساختارهای ثانویه پیچیدهای تولید میکردند. نتایج آنالیز ضد میکروبی in silico، فعالیت ضد میکروبی بالا را در دیفنسینهای جداسازی شده نشان داد. آنالیز بیان ژن in silico، الگوی متفاوتی از بیان را برای دیفنسینها نشان داد. شناسایی توالی کدکننده ژنهای ضد میکروبی و بررسی خصوصیات آنها اولین قدم در مهندسی ژنتیک است. در این پژوهش برای اولین بار، توالی کدکننده کامل 6 ژن از ژنهای خانواده دیفنسین از گیاه عدس جداسازی شد و ساختار و ویژگیها و الگوی بیانی آنها مشخص شد.
نوع مطالعه:
پژوهشی کامل |
موضوع مقاله:
ژنتیک گیاهی دریافت: 1398/7/8 | پذیرش: 1398/7/8 | انتشار: 1398/7/8