2 نتیجه برای بیان هترولوگ
ایمـان سلیمانیفـرد، آذر شاهپیـری،
دوره 10، شماره 3 - ( 10-1394 )
چکیده
متالوتیونینها (MTs) گروهی از پروتئینهای با وزن ملکولی پایین و غنی از آمینواسید سیستئین هستند که به واسطه دارا بودن گروه تیول فراوان، با فلزات مختلف اتصال پیدا میکنند. در گیاهان ایزوفرمهای مختلفی از MT وجود دارد. در این پژوهش به منظور بررسی نقش ایزوفرم OsMTI-3a از گیاه برنج که متعلق به تیپ3 میباشد، توالی کدکننده این ایزوفرم در ناقل بیانی pET41a همسانهسازی و به میزبان بیانی E. coli سویه Rosetta (DE3) ترانسفورم شد. پس از القای باکتری با IPTG، تولید این پروتئین همراه با شریک الحاقی GST در فاز محلول تایید شد. سویه شاهد نیز با انتقال پلاسمید بدون ژن به سویه Rosetta (DE3) تولید شد. مقایسه منحنی رشد سلولهای باکتری بیانکننده پروتئین نوترکیب با باکتری شاهد در محیط حاوی هر یک از فلزات Cu، Zn، Cd و Ni و همچنین مقدار کاهش فلزات در محیط کشت و تجمع آنها در رسوب باکتریایی توسط دستگاه طیف سنج جذب اتمی (AAS) نشان داد که سویه تراریخته قابلیت جذب فلزات را به صورت Cd>Ni>Zn>Cuدارد.
احسان شیخ الاسلام اصفهانی، آذر شاه پیری،
دوره 14، شماره 1 - ( 3-1398 )
چکیده
گلوتاردوکسینها (Grxها) ﭘﺮوﺗﺌﯿﻦﻫﺎیﯽ ﺑﺎ وزن ﻣﻮﻟﮑﻮﻟﯽ پایین ﻫﺴﺘﻨﺪ ﮐﻪ ﺑﺎ داﺷﺘﻦ یﮏ ﮔﺮوه ﺗﯿﻮل-دی ﺳﻮﻟﻔﯿﺪ در ﺟﺎیﮕﺎه ﻓﻌﺎﻟﺸﺎن در اﺣﯿﺎ ﺑﺮﮔﺸﺖﭘﺬیﺮ ﭘﯿﻮﻧﺪﻫﺎی دی ﺳﻮﻟﻔﯿﺪی ﻧﻘﺶ دارﻧﺪ. این پروتئینها توسط آنزیم گلوتاتیون ردوکتاز توسط مولکول گلوتیون احیا میشوند. سپس این پروتئین خود در احیای باندهای دی سولفیدی پروتئینهای دیگر دخالت دارد. ایﺰوﻓﺮمﻫﺎی ﻣﺨﺘﻠﻔﯽ از Grx در ﮔﯿﺎﻫﺎن وﺟﻮد دارد. در ﭘﮋوﻫﺶ ﺣﺎﺿﺮ ﺗﻮاﻟﯽ ژن کدکننده ایﺰوﻓﺮم OsGrx9 از ﮔﯿﺎه ﺑﺮﻧﺞ ﭘﻼﺳﻤﯿﺪ ﺑﯿﺎﻧﯽ pET28a، ﻫﻤﺴﺎﻧﻪﺳﺎزی و ﺳﭙﺲ ﺑﻪ ﺳﻮیﻪی ﻣﻨﺎﺳﺒﯽ از ﺑﺎﮐﺘﺮی اﺷﺮیﺸﯿﺎ ﮐﻠﯽ ﺑﻪﻧﺎم (DE3) Rosetta ﻣﻨﺘﻘﻞ ﺷﺪ. ﺑﺎ ﺗﺤﺮیﮏ ﭘﺮوﻣﻮﺗﺮ T7 ﺑﻪوﺳﯿﻠﻪی IPTG، ﻣﯿﺰان ﻣﻨﺎﺳﺒﯽ از ﭘﺮوﺗﺌﯿﻦ ﻧﻮﺗﺮﮐﯿﺐ His-OsGrx9 در فاز محلول باکتری ﺗﻮﻟﯿﺪ شد و سپس ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از روش ﮐﺮوﻣﺎﺗﻮﮔﺮاﻓﯽ تمایلی ﺧﺎﻟﺺﺳﺎزی ﺷﺪ .ﻓﻌﺎﻟﯿﺖ اﺣﯿﺎیﯽ این ایﺰوﻓﺮم ﻧﻮﺗﺮﮐﯿﺐ ﺗﻮﻟﯿﺪ ﺷﺪه ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از اﻧﺴﻮﻟﯿﻦ ﺑﻪﻋﻨﻮان ﺳﻮﺑﺴﺘﺮای اﻟﮑﺘﺮون ﮔﯿﺮﻧﺪه و حضور DTTیا GSH ﺑﻪﻋﻨﻮان عوامل اﺣﯿﺎﮐﻨﻨﺪه مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که Grx9 در محیط این ویترو بهخوبی فعال میباشد. بهنظر میرسد فعالیت این پروتئین در حضور GSH کاملا وابسته به pH محیط میباشد.
