TY - JOUR T1 - Expression of the humanized anti-HER2/neu monoclonal antibody trastuzumab in transgenic tobacco plants TT - بیان آنتی‌بادی تک دودمانی ضد HER2/neu انسانی Trastuzumab در توتون تراریخته JF - MGJ JO - MGJ VL - 10 IS - 2 UR - http://mg.genetics.ir/article-1-1351-fa.html Y1 - 2015 SP - 151 EP - 166 KW - Agrobacterium tumefaciens KW - Gene expression KW - Nicotiana tabacum KW - Recombinant protein KW - Trastuzumab antibody N2 - سرطان پستان شایع‌ترین نوع سرطان در میان زنان است و سالانه بیش از نیم میلیون زن به این بیماری مبتلا می‌شوند.Trastuzumab (با نام تجاری Herceptin®) یک آنتی‌بادی تک دودمانی انسانی شده مشتق از تکنولوژی DNA نوترکیب است که در درمان سرطان پستان متاستاتیک مورد استفاده قرار می‌گیرد. با این حال، درمان باTrastuzumab هزینه بسیار زیادی داشته و یک دوره درمان یکساله برای بیمار نیاز به صرف هزینه بیش از 200 میلیون تومان دارد. در این تحقیق امکان تولید آنتی‌بادی Trastuzumab در گیاه توتون با استفاده از تراریختی پایدار به واسطه Agrobacterium tumefaciens بررسی شد. ریزنمونه‌های برگ توتون رقم Gewone groene با آگروباکتریوم سویه LBA4404 حاوی وکتورهای دوتایی pBIN19-NTopTras-LC و pBIN19-NTopTras-HC، دربردارنده به ترتیب ژن‌های رمز کننده زنجیره سبک (LC) و زنجیره سنگین (HC) آنتی‌بادی Trastuzumab، تلقیح شدند. تجزیه لکه‌گذاری سادرن درج یک الی سه نسخه از ژن‌های HC و LC در ژنوم گیاهان تراریخته را تایید کرد. بیان تراژن‌ها در سطح RNA با تجزیه RT-PCR نیمه کمی مورد تایید قرار گرفت. تجمع پروتئین در گیاهان با تجزیه لکه‌گذاری وسترن مشخص شد و محتوی آنتی‌بادی در گیاهان تراریخته 1/0 درصد پروتئین محلول کل برآورد شد. تجزیه ایمونوبلات عصاره خام گیاهان نشان داد کهTrastuzumab در گیاهان به شکل تترامر (H2L2) تجمع می‌یابد. تجزیه نتاج T1 وراثت پایدار و تفکیک همزمان ‌تراژن‌ها به صورت یک مکان ژنی منفرد مندلی را تایید کرد. نتایج این تحقیق نشان داد که گیاهان می‌توانند به عنوان یک سامانه جایگزین برای تولید مقرون به صرفه پروتئین‌های دارویی با ارزش بالا مورد استفاده قرار گیرند. این مطالعه، برای اولین بار در کشور، گام نخست اساسی به سمت توسعهTrastuzumab گیاهی را پیشنهاد می‌کند. M3 ER -