fa بیان ژنgyrI درموتان های مقاوم به سیپروفلوکسازین در E. coli پس از تیمار با سیپروفلوکسازین ژنتیک ریزسازواره Subject 04 پژوهشي کوتاه Research <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><span style="font-family:Tahoma;"><span style="font-size:10.0pt;">گسترش مقاومت در باکتری‌های گرم‌منفی به‌خصوص سویه‌های بیماری‌زا اشریشیا کلی، موجب کاهش اثر‌بخشی آنتی‌بیوتیک‌ها از جمله سیپروفلوکسازین در درمان بیماری‌های عفونی شده‌است</span><span dir="LTR">.</span><span style="font-size:10.0pt;"> هدف‌ مهم این آنتی‌بیوتیک‌</span> <span style="font-size:10.0pt;">در ‌باکتری اشریشیا کلی</span><em><span style="font-size:10.0pt;">، </span></em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">DNA</span></span><span style="font-size:10.0pt;">‌‌جیراز است. یکی از مهار‌کننده‌های</span><span dir="LTR">DNA </span><span style="font-size:10.0pt;">‌جیراز پروتئین </span><span dir="LTR">GyrI</span><span style="font-size:10.0pt;"> است که با اتصال به</span><span dir="LTR">DNA </span><span style="font-size:10.0pt;">‌جیراز مانع از اتصال سیپروفلوکسازین به این آنزیم می شود. بنابراین هدف از این مطالعه بررسی بیان ژن</span> <em><span dir="LTR">gyrI</span></em><span style="font-size:10.0pt;"> درموتان مقاوم به سیپروفلوکسازین در باکتری اشریشیا کلی بود.</span> <span style="font-size:10.0pt;">برای بررسی بیان ژن</span> <span style="font-size:10.0pt;">ابتدا </span><span dir="LTR">RNA</span><span style="font-size:10.0pt;"> سلول در مرحله‌ی نمایی‌رشد استخراج شد و پس‌از سنتز</span><span dir="LTR">cDNA</span><span style="font-size:10.0pt;"> میزان بیان این ژن در موتان مقاوم به سیپروفلوکسازین در مقایسه با سویه‌ی تیپ وحشی با روش</span><span dir="LTR">Real Time PCR </span><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;اندازه‌گیری شد. نتایج حاصل از</span><span dir="LTR">Real Time PCR </span><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;نشان داد که ژن</span> <em><span dir="LTR">gyrI</span></em><span style="font-size:10.0pt;"> در موتان مقاوم به سیپروفلوکسازین در فاز نمایی رشد افزایش بیان دارد. افزایش بیان ژن</span> <em><span dir="LTR">gyrI</span></em><span style="font-size:10.0pt;"> در حضور و عدم حضور سیپروفلوکسازین نسبت به بیان این ژن در سویه تیپ وحشی معنی‌دار بود (05/0</span><span dir="LTR">P<</span><span style="font-size:10.0pt;">). افزایش بیان این ژن در عدم حضور و در حضور سیپروفلوکسازین در موتان مقاوم تقریبا به‌ترتیب 8 و 63 برابر مقدار بیان شده در سویه‌ی تیپ وحشی بود. در نتیجه به‌نظر می‌رسد که در موتان مقاوم به سیپروفلوکسازین بیش بیانی پروتئین </span><span dir="LTR">GyrI</span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;"> در فاز نمایی رشد مخصوصاً در حضور سیپروفلوکسازین عامل مهمی در مهار آنزیم‌‌</span></span><span dir="LTR">DNA </span><span style="font-size:10.0pt;">جیراز و مقاومت به سیپروفلوکسازین باشد. </span><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></p> The spread of resistance to gram-negative bacteria, especially strains of <em>Escherichia</em> <em>coli</em>, has reduced the effectiveness of antibiotics, including ciprofloxacin in the treatment of infectious diseases. The main target of this antibiotic in <em>Escherichia</em> <em>coli</em> is DNA gyrase. GyrI is one of the inhibitors of DNA gyrase that binds to DNA gyrase to prevent the binding of ciprofloxacin. Therefore, the aim of this study was to investigate the expression of <em>gyrI</em> in a ciprofloxacin resistant mutant of <em>Escherichia</em> <em>coli</em> following treatment with ciprofloxacin. To evaluate <em>gyrI</em> expression, cell RNA was extracted at the exponential phase of growth and after cDNA synthesis, <em>gyrI</em> gene expression of ciprofloxacin resistant mutant was measured as compared to wild type strain by Real Time PCR. The results of Real Time PCR showed that the expression of <em>gyrI</em> gene was increased in ciprofloxacin resistant mutant in exponential phase of growth. Increased expression of gyrI in presence and absence of ciprofloxacin in comparison to the wild type strain was significant (P<0.05). Increased expression of this gene in presence and absence of ciprofloxacin in the mutant cell was 63 and 8 times of that in wild type strain, respectively. In conclusion, it seems that in ciprofloxacin resistant mutant GyrI overexpression in exponential phase of growth especially in the presence of ciprofloxacin is an important factor in DNA gyrase inhibition and resistance to ciprofloxacin. اشریشیا کلی, سیپروفلوکسازین, DNA جیراز, GyrI, Real Time PCR Ciprofloxacine, DNA gyrase, Escherichia coli, GyrI, Real Time PCR 175 181 http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-138-1&slc_lang=fa&sid=1 Arefeh Shahmohammadi beni عارفه شاه محمدی بنی 10031947532846005657 10031947532846005657 No Dept of Genetics Faculty of Science, Shahrekord University, Shahrekord, Iran گروه ژنتیک، دانشکده ی علوم، دانشگاه شهرکرد، ایران Razieh Pourahmad راضیه پوراحمد 10031947532846005658 10031947532846005658 Yes Dept. of Genetics, Faculty of Science, Shahrekord University, Shahrekord, Iran گروه ژنتیک، دانشکده ی علوم، دانشگاه شهرکرد، ایران Mohammad Reza Mahzoonieh ، محمدرضا محزونیه 10031947532846005659 10031947532846005659 No Dept. of Pathbiology, Faculty of Veterinary, Shahrekord Univ. Shahrekord, Iran گروه پاتوبیولوژی دانشکده ی دامپزشکی، دانشگاه شهرکرد، ایران