Modern Genetics Journal

fa تأثیر متیل جاسمونات بر روی بیان ژن ts و تاکسول تولیدی در ساقه گیاه سرخدار (Taxus baccata) The effect of Methyl jasmonate on the expression of ts gene and Taxol production in the stem of Yew (Taxus baccata) ژنتیک گیاهی Subject 01 پژوهشی کامل Applicable <h1 dir="RTL" style="text-align:justify">گیاهان دارویی منبع تامین بیش از ۲۵% کل داروهای مصرفی دنیا را تشکیل می‌دهند که نقش ویژه‌ای را در تامین داروهای ضد سرطانی ایفا می‌کنند. یکی از مهم‌ترین این داروها تاکسول است. منبع طبیعی این ماده‌ی با ارزش گونه‌های جنس سرخدار (Taxus) است. تولید تاکسول در یک مسیر پیچیده آنزیمی صورت می‌گیرد که تحت تاثیر عوامل گوناگون می‌باشد، بنابراین در این مطالعه، شناسایی میزان تاثیر متیل جاسمونات در تغییر بیان ژن (ts)  Taxadiene synthaseو تولید تاکسول در گیاه سرخدار، هدف‌گذاری شده است. در تحقیق حاضر، نمونه‌های گیاهی با متیل‌جاسمونات در غلظت‌های متفاوت ۰، ۱۰۰، ۲۵۰ و ۵۰۰ میکرومولار و دو زمان ۴۸ و ۷۲ ساعت تیمار شدند و در این مدت در فیتوترون نگه‌داری شدند. سپس بیان ژن ts با روش Real Time CR اندازه‌گیری شد. ‌علاوه بر این میزان تاکسول تولیدی نیز با تکنیک HPLC ارزیابی شد و اطلاعات به‌دست آمده مورد آنالیز قرار گرفت. نتایج نشان داد که بیشترین بیان ژن در تیمار 250 میکرومولار متیل جاسمونات و در 72 ساعت و معادل 13/1 برابر گیاه شاهد و کمترین میزان بیان ژن با کمتر از 5 درصد گیاه شاهد مربوط به تیمار 250 میکرومولار و در 48 ساعت بود. داده‌های حاصل از کروماتوگرافی نشان داد که بیشترین میزان تاکسول در گیاه تحت تیمار با غلظت ۵۰۰ میکرومولار متیل‌جاسمونات و زمان ۷۲ ساعت به میزان ۳۰۷/۰ میلی‌گرم تاکسول بر گرم وزن خشک نمونه گیاهی تولید شده است. همچنین تیمار 250 میکرومولار متیل جاسمونات با 72 ساعت و تولید 08/۰ میلی‌گرم تاکسول، کمترین بود. آزمون همبستگی پیرسون بیان داشت که رابطه‌ی مشخصی بین بیان ژن و تاکسول تولیدی وجود ندارد. این امر به‌دلیل اثرات پیچیده متیل جاسمونات بر روی بیان ژن و تولید تاکسول در بازه‌های زمانی متفاوت می‌باشد. علی‌رغم تلاش‌های فراوان صورت گرفته در زمینه‌ی شناخت مسیر بیوسنتزی تاکسول، هنوز هم تصویر کاملاً روشن و دقیقی از آن در دسترس نمی‌باشد. به‌همین منظور بررسی ژن‌های دخیل در این مسیر بیوسنتزی حائز اهمیت می‌باشد.</h1> <h1 dir="RTL" style="text-align:justify"></h1> <div style="text-align: justify;">Medicinal plants are the source of more than 25% of all drugs consumed in the world, which play a special role in the supply of anti-cancer drugs. One of the more important of these drugs is Taxol. The natural source of this valuable substance is the species of Yew (Taxus baccata). Taxol production takes place in a complex enzymatic pathway that is influenced by a variety of factors, so the aim of this study was to identify the effect of methyl jasmonate on altering the expression of the Taxadiene synthase (ts) gene and Taxol production in Yew. In the following research, plant samples were treated with methyl jasmonate in different concentrations of 0, 100, 250 and 500 μM for two different hours of 48 and 72, during which time they were stored samples in phytotron. Then, ts gene expression was measured by Real Time PCR approach. In addition, the amount of Taxol production was evaluated by HPLC technique and the obtained data was analyzed. The results showed that at 72 hours, expression of ts gene at a concentration of 250 μM was 1.13 times higher than the control plant and the lowest gene expression with less than 5% of the control plant was related to 250 μM treatment in 48 hours. Chromatography analysis showed that the highest amount of Taxol produced in the treated plant with a concentration of 500 μM methyl jasmonate and at time of 72 hours was 0.307 mg/g dry weight. Also, treatment of 250 μM methyl jasmonate with 72 hours and production of 0.08 mg Taxol was the lowest. Pearson correlation test showed that there is no clear relationship between gene expression and Taxol production. This is due to the complex effects of methyl jasmonate on gene expression and Taxol production at different time. Despite many efforts to identify the biosynthetic pathway of Taxol, a clear and accurate imagine of it still is not available. Therefore, it is important to study the important genes involved in this biosynthetic pathway.</div> بیان ژن, تاسکول, سرخدار, کروماتوگرافی,ts Gene expression, HPLC, Taxol, ts, Yew 351 357 http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-373-1&slc_lang=fa&sid=1 Yalda Zhoulideh یلدا ژولیده yalda.zhoolideh@gmail.com 10031947532846007253 10031947532846007253 No سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی Yousef Mohammadi یوسف محمدی mohammadi.yousef63@gmail.com 10031947532846007254 10031947532846007254 Yes سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی MR Mashayekhi محمد رضا مشایخی mashayekhi.mrz@gmail.com 10031947532846007255 10031947532846007255 No دانشگاه آزاد