fa ارزیابی اثر هدف‌گیری درون سلولی روی تجمع نانوبادی نوترکیب Anti-VEGF در گیاه کدو ژنتیک گیاهی Subject 01 پژوهشی کامل Applicable <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="tab-stops:right 459.0pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:">زراعت مولکولی در سه دهه‌ی اخیر</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:">به‌عنوان یک استراتژی جایگزین و مقرون به‌صرفه برای تولید موفق صدها پروتئین نوترکیب دارویی در مقیاس بالا با استفاده از گیاهان ظهور کرده است.<span blotus="" class="fontstyle01" style="font-family:"><span style="color:black"><span style="font-weight:normal"><span style="font-style:normal"><span b="" lotus="" style="font-family:"> از آنجا که سلول‌های توموری برای رشد و تهاجم به رگزایی نیاز دارند، لذا هدف‌گیری مهمترین فاکتور رگزایی یعنی فاکتور رشد اندوتلیال عروقی (</span></span></span></span></span></span></span><span blotus="" class="fontstyle01" style="font-family:"><span style="color:black"><span style="font-weight:normal"><span style="font-style:normal"><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">VEGF</span></span></span></span></span></span><span blotus="" class="fontstyle01" style="font-family:"><span style="color:black"><span style="font-weight:normal"><span style="font-style:normal"><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:">) با استفاده از پروتئین‌ نوترکیب دارویی </span></span></span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Anti-VEGF</span></span><span blotus="" class="fontstyle01" style="font-family:"><span style="color:black"><span style="font-weight:normal"><span style="font-style:normal"><span style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"> بیان شده در گیاه می‌تواند به‌عنوان یک رویکرد موثر برای مهار رگزایی و درمان سرطان عمل نماید. </span></span></span></span></span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"><span style="color:black">یکی از مشکلات اصلی برای تجاری‌سازی زراعت مولکولی سطح بیان پایین پروتئین نوترکیب می‌باشد. بنابراین رویکردهای متعددی از جمله استفاده از پیش‌برنده‌های قوی رونویسی، بهینه‌سازی کدونی توالی پروتئین، هدف‌گیری درون سلولی مناسب و آزمون سیستم‌های بیانی مختلف مبتنی بر گیاه برای افزایش بیان پروتئین ایجاد شده است. در این مقاله، اثر هدف‌گیری آپوپلاستی و شبکه آندوپلاسمی روی تجمع پروتئین نوترکیب </span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">Anti-VEGF</span></span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"><span style="color:black"> در گیاه کدو بررسی شد. بدین منظور، آنالیزهای مولکولی مختلف (</span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">RT-PCR</span></span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"><span style="color:black">، </span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">Dotblot</span></span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"><span style="color:black">،</span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">SDS-PAGE </span></span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"><span style="color:black">، </span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">Westernblot</span></span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"><span style="color:black"> و </span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">ELISA</span></span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"><span style="color:black">) انجام شد. نتایج نشان داد که هدف‌گیری به شبکه آندوپلاسمی می‌تواند منجر به تجمع بالاتر پروتئین نوترکیب (شش برابر) نسبت به آپوپلاست شود. بنابراین شبکه آندوپلاسمی می‌تواند مکان مناسب‌تری برای بیان پروتئین نوترکیب هدف و سایر پروتئین‌های نوترکیب دیگر نسبت به آپوپلاست ‌باشد.</span></span></span></span></span></span></span></span></span> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><span lang="EN" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">In the last three decades, molecular farming has emerged as an alternative and cost-effective strategy for the successful production of hundreds of large-scale pharmaceutical recombinant proteins using plants.</span></span><span lang="EN" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""> Because tumor cells need angiogenesis to grow and invade, therefore, targeting the most important angiogenic factor (vascular endothelial growth factor, VEGF) using the plant-based recombinant anti-VEGF can be an effective approach to inhibit angiogenesis and cancer treatment. </span></span><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">The low expression level of recombinant protein is one of the major obstacles for the commercialization of molecular pharming. Therefore, numerous techniques have been developed to enhance protein expression, including codon optimization of protein sequences, appropriate subcellular targeting; the use of strong promoters, and the testing of different plant-based expression systems. In this paper, we investigate the effect of apoplast and </span></span></span><span lang="EN" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">endoplasmic reticulum</span></span><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black"> (ER) targeting on Anti-VEGF recombinant nanobody accumulation in cucurbit plant. </span></span></span><span lang="EN" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">for this purpose</span></span></span><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">, </span></span></span><span lang="EN" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">different molecular analyzes (</span></span></span><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">RT-PCR, Dotblot, SDS-PAGE, Westernblot and ELISA</span></span></span><span lang="EN" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">) were performed </span></span></span><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">and the results showed that </span></span></span><span lang="EN" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">ER targeting increased protein expression about 6-fold compared to its expression in the apoplast. Therefore, the </span></span><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">ER</span></span></span><span lang="EN" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""> is a more suitable site for expression of the target recombinant protein and other recombinant proteins than for apoplast.</span></span><span dir="RTL" lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"><span style="color:#242021"></span></span></span></span></span></span></span><br> &nbsp; پروتئین نوترکیب, رگزایی, زراعت مولکولی, شبکه آندوپلاسمی, هدف‌گیری درون سلولی Angiogenesis, Endoplasmic reticulum, Molecular farming, Subcellular targeting, Recombinant protein 365 373 http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-165-1&slc_lang=fa&sid=1 Mojgan Soleimanizadeh مژگان سلیمانی زاده m.soleimani380@gmail.com 10031947532846007317 10031947532846007317 Yes 1Department of Horticultural Science, Faculty of Agriculture and Natural Resources, University of Hormozgan, Bandar Abbas, Iran گروه علوم و مهندسی باغبانی، دانشکده کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه هرمزگان، بندرعباس، ایران Jalali Javaran Mokhtar مختار جلالی جواران jalali.mokhtar.@gmail.com 10031947532846007318 10031947532846007318 No 2Department of Biotechnology, Tarbiat Modares University, P.O. Box 14115-336, Tehran, Iran گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Bagheri Abdolreza عبدالرضا باقری bagheriyazd.@gmail.com 10031947532846007319 10031947532846007319 No 3Department of Biotechnology and Plant Breeding, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran گروه بیوتکنولوژی و به‌نژادی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران Mahdi Behdani مهدی بهدانی behdani730423@yahoo.com 10031947532846007320 10031947532846007320 No 4Venom & Biotherapeutics Molecules Lab, Biotechnology Research Center, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran بخش بیوتکنولوژی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتوپاستور ایران، تهران، ایران