fa تشخیص مشاهده‌ای ویروس X سیب‌زمینی در آزمون IC-RT-LAMP با استفاده از رنگ HNB ژنتیک گیاهی Subject 01 پژوهشی کامل Applicable <h1 dir="RTL" style="text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:tahoma;">سیب&shy;زمینی به‌وسیله ویروس&shy;های مختلفی آلوده می&shy;شود که می&shy;توانند عملکرد را کاهش دهند، ویروس <span dir="LTR">X</span> سیب‌زمینی (<span dir="LTR">PVX</span>) به لحاظ اقتصادی یکی از ویروس‌های مهم این محصول است. روش&shy;های متعددی شامل آزمون‌های سرولوژیکی و مولکولی جهت تشخیص این ویروس وجود دارند، اما این روش&shy;ها زمان&shy;بر بوده و نیازمند ابزارهای پیچیده&shy;ای هستند. هدف از این پژوهش، کاهش زمان مورد نیاز جهت تشخیص <span dir="LTR">PVX</span> با استفاده از روش <span dir="LTR">IC-RT-LAMP</span> بود. نمونه‌های برگی (50 نمونه) با علایم مشابه به ویروس <span dir="LTR">X</span> سیب&shy;زمینی از سطح استان کردستان جمع‌آوری و برای آزمون سرولوژیکی (<span dir="LTR">DAS-ELISA</span>) به‌کارگرفته شدند. واکنش&shy; <span dir="LTR">IC-RT-LAMP</span> به‌صورت یک مرحله&shy;ای (بدون نیاز به استخراج <span dir="LTR">RNA</span>)، تحت شرایط هم&shy;دما انجام شد و نتایج به‌وسیله الکتروفورز بر روی ژل آگارز و رنگ هیدروکسی&shy;نفتول&shy;بلو (<span dir="LTR">HNB</span>) ارزیابی شد. نتیجه مثبت استفاده از رنگ <span dir="LTR">HNB</span> تغییر رنگ مخلوط واکنش از بنفش به آبی آسمانی بود. از مزایای روش <span dir="LTR">IC-RT-LAMP</span> در مقایسه با سایر روش‌های پیشین می‌توان به اختصاصیت بالا، حساسیت بالا، سرعت بالا، کارآیی بالا، ایمنی، سهولت، عدم نیاز به تجهیزات پر هزینه جهت تکثیر، عدم نیاز به استخراج <span dir="LTR">RNA</span>، عدم نیاز به کارهای تشخیصی بعد از تکثیر، تشخیص مشاهده&shy;ای و کاربر دوستی آن اشاره کرد.</span></span></h1> Potato can be contaminated by many different viruses that can reduce yield .<em> Potato virus X</em> (PVX) is one of the most economically important viruses of this product. There are several techniques to detect PVX including serological and molecular assays but these methods are time consuming and requiring using complicated tools. The aim of this study was to reduce the time required to detect PVX, using IC-RT-LAMP technique. Fifty leaf samples with symptoms similar to PVX were collected from Kurdestan province and were subjected to a serological (DAS-ELISA) test. One-step IC-RT-LAMP reaction was carried out under isothermal conditions (without RNA extraction) and results were evaluated by agarose gel electrophoresis and hydroxynaphthol blue (HNB) dye. A positive result using the HNB dye was a color change in master-mix from the violet to sky blue. The advantages of IC-RT-LAMP method in compare to other methods are the high specificity, high sensitivity, high rapidity, high efficiency, safety, high efficiency, no expensive tools for amplification, no RNA extraction, no post-amplification treatment of the amplicons, visual detection and user friendly. الایزا IC-RT-LAMP رنگ HNB ویروس X سیب‌زمینی ELISA, IC-RT-LAMP, HNB dye, Potato virus X 293 299 http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-1-39&slc_lang=fa&sid=1 M Amin Almasi محمد امین الماسی aminalmasi66@gmail.com 1003194753284600284 1003194753284600284 Yes دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال، باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، تهران، ایران A Moradi ابوبکر مرادی 1003194753284600285 1003194753284600285 No گروه بیوتکنولوژی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه زنجان، زنجان، ایران