گروه بیوتکنولوژی کشاورزی و منابع طبیعی، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران، کرج
چکیده: (1558 مشاهده)
راهاندازهای کوتاه و قدرتمند از اجزای کلیدی بیان موفق پروتئین نوترکیب در میزبانهای مختلف از جمله مخمر Pichia pastorisمیباشند. در این مطالعه بیان خارج سلولی آنزیم سلولاز بتااندوگلوکاناز (CMC3) تحت کنترل راهانداز متانولاکسیداز (MOX) و الکلاکسیداز 1 (AOX1) با تحت خوراکدهی متانول مورد بررسی قرار گرفت. بهمنظور حذف اثر تعداد کپی، کلونهای نوترکیب حاوی یک نسخه جایگیری در ژنوم با استفاده از روش Real-Time PCR شناسایی و مورد استفاده قرار گرفتند. نتایج حاصل از سنجش فعالیت آنزیم، زایموگرافی و SDS-PAGE بیان قدرتمند و قابل مقایسه سلولاز تحت کنترل هر دو راهانداز MOX و AOX1 در این مخمر را نشان دادند. نتایج بیان قوی CMC3 نشان داد که راهانداز کوتاه MOX میتواند با موفقیت برای تولید پروتئین نوترکیب با بیان بالا مورد استفاده قرار گیرد.
نوع مطالعه:
پژوهشی کامل |
موضوع مقاله:
ژنتیک گیاهی دریافت: 1397/8/8 | پذیرش: 1397/12/15 | انتشار: 1398/7/7