fa جهش القایی در ژن کنترل کننده فعالیت هسته یخ با جهش‌زای EMS در دو جدایه از باکتری شبه Pseudomonas viridiflava باکتری‌های مولد هسته یخی با افزایش جمعیت و فعالیت خود باعث سرمازدگی گیاهان در دماهای بالاتر از معمول می‌شوند. اساس ژنتیکی هسته‌های یخی باکتریایی به صورت تک ژن کروموزومی ina(Ice nucleation active) میباشد. برای ایجاد جهش در ژن ina، باکتری شبه Pseudomonas viridiflava از ماده EMS در دو غلظت 20 و 25 میکرولیتر در میلی‌لیتر استفاده شد. جهت ردیابی ژن ina در جدایه‌های شبه P. viridiflava از روش واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز با یک جفت آغازگر اختصاصی ژن ina که از روی نواحی حفظ شده ژن هسته یخ در چندین گونه باکتری مولد هسته یخی، طراحی شد، استفاده شد. فعالیت هسته یخ با آزمون انجماد قطره‌ای ارزیابی شد. برای بررسی از دست رفتن فعالیت هسته یخی، سوسپانسیون حاوی 107 سلول در میلی‌لیتر هر جهش‌یافته بر روی گیاهچه-های پرتقال پاشیده شده و از گیاهچه تیمار شده با آب مقطر استریل به عنوان شاهد منفی استفاده شد. گیاهان به مدت 7 تا 10 ساعت در دمای 10- درجه سانتی‌گراد نگهداری شدند و سپس به گلخانه برگردانده شدند. تعدادی از جهش‌یافته‌های به دست آمده در گیاهچه‌ها ایجاد یخ‌زدگی نکردند. Ice nucleation active bacteria in high populations are the cause of frost injury to the plants at higher subzero temperatures. Ice nucleation genetic base of bacteria is single chromosomal gene ina. To inducing mutations in ina gene, Pseudomonas viridiflava like bacteria were incubated with the mutagenic material (EMS) in 20 and 25 µl/ml concentrations.To track ina gene in isolates of P. viridiflava like polymerase chain reaction was used by ina gene special primer that was designed of conserved regions of gene in several species of ice nucleation bacteria. Ice nucleation activity was assessed using a drop of freezing. To investigate the loss of ice nucleation activity in suspensions containing 107 cells per ml (0.5 absorbance units at 600 nm) of each mutant was sprayed on orange seedlings and seedlings treated with sterile distilled water were used as negative controls. Seedlings were kept for 7 to 10 hours at -10 °C and then were returned to the greenhouse. Four mutant colonies were not able to create any frost damage on experimental seedlings. جهش,هسته یخ,EMS,Pseudomonas viridiflav EMS,Ice nucleation,Mutant,Pseudomonas viridiflava 447 450 http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-109-380&slc_lang=fa&sid=1 سیده فاطمه رشیدایی سیده فاطمه رشیدایی 10031947532846002356 10031947532846002356 No حشمت اله رحیمیان حشمت اله رحیمیان 10031947532846002357 10031947532846002357 No غلامعلی رنجبر غلامعلی رنجبر 10031947532846002358 10031947532846002358 No