fa بیان ژن های دفاعی لوبیا محلی گیلان (Phaseolus vulgaris L.) تحت آلودگی با قارچ Sclerotium rolfsii ژنتیک گیاهی Subject 01 پژوهشی کامل Applicable &nbsp;&nbsp;&nbsp; <span dir="RTL">لوبیا، یکی از حبوبات غنی از پروتئین </span><span dir="RTL">است که در اثر بیماری</span> <span dir="RTL">&shy;</span><span dir="RTL">با</span><span dir="RTL"> قارچ خاک&shy;زاد </span><em>Sclerotium rolfsii</em><span dir="RTL">، </span><span dir="RTL">دچار پوسیدگی طوقه و کاهش شدید عملکرد می&shy;شود</span>.<span dir="RTL"> زراعت لوبیا در گیلان، عمدتاً به کشت بهاره و تابستانه نوعی لوبیای محلی پاکوتاه با رگه&shy; های قرمز و سرمه&shy;ای بر روی دانه، اختصاص دارد. 30 لاین انتخابی لوبیا محلی گیلان، با بیماری&shy;زاترین جدایه </span><em>S. rolfsii</em> <span dir="RTL">تحت آلوده&shy;سازی مصنوعی در گلخانه قرار گرفتند. در این بررسی </span><span dir="RTL">شاخص شدت بیماری </span><span dir="RTL">(</span>DSI<span dir="RTL">)</span><span dir="RTL"> و صفات مورفولوژیک مرتبط با واکنش به قارچ اندازه&shy;گیری شدند. </span><span dir="RTL">از 8 </span><span dir="RTL">نشانگر اختصاصی </span>SCAR <span dir="RTL">پیوسته با مقاومت به بیماری قارچی لوبیا نیز برای ارزیابی تکمیلی </span><span dir="RTL">استفاده شد. تغییرات بیان سه ژن دفاعی کیتیناز (</span><em>Chiti</em><span dir="RTL">)، چالکون ایزومراز (</span><em>ChI</em><span dir="RTL">) و فنیل&shy;آلانین</span> <span dir="RTL">آمونیالیاز-3 (</span><em>PAL-3</em><span dir="RTL">) </span><span dir="RTL">با کمک </span>RT-PCR <span dir="RTL">در لاین&shy;های منتخب از هر یک از گروه&shy;های مقاوم، متحمل و حسّاس&shy;، با فواصل </span><span dir="RTL">2، 4 و 6 روز پس از آلوده&shy;سازی</span><span dir="RTL"> مصنوعی با قارچ </span><em>S. rolfsii</em> <span dir="RTL">مورد ارزیابی قرار گرفت</span><span dir="RTL">.</span> <span dir="RTL">غربالگری ژنوتیپ&shy;&shy;ها با استفاده از داده&shy;های گلخانه&shy; و نشانگرهای </span>SCAR<span dir="RTL">، منجر به تفکیک ژنوتیپ&shy;ها و شناسایی 1 مقاوم، 21 متحمل و نیمه حساس و 8 ژنوتیپ کاملاً حساس گردید. </span><span dir="RTL">نتایج نشان داد، </span><span dir="RTL">ژن </span><em>Chiti</em> <span dir="RTL">با افزایش تدریجی بیان در طی زمان در لاین&shy;های مقاوم و متحمل، روند مشابهی داشت، هرچند که میزان بیان در مقاوم&shy;ها بیش از متحمل&shy;ها بود. اگرچه </span><span dir="RTL">بیان ژن&shy;های </span><em>ChI</em><span dir="RTL"> و </span><em>PAL-3</em> <span dir="RTL">نیز در ژنوتیپ&shy;های مقاوم روند افزایشی داشت، ولی تغییرات بیان با گذشت زمان مانند روند </span><span dir="RTL">ژن </span><em>Chiti </em><span dir="RTL">نبود</span><em><span dir="RTL">.</span></em> <span dir="RTL">لذا ژن </span><em>Chiti</em><span dir="RTL"> می&shy;تواند عامل اصلی مقاومت به </span><span dir="RTL">قارچ </span><em>S. rolfsii </em><span dir="RTL">در لوبیا محلی گیلان باشد. &nbsp;</span> Bean is one of the protein-rich legumes that can cause collar rot and severe loss of yield due to <em>Sclerotium</em> <em>rolfsii</em>. Bean cultivation in Guilan is mainly devoted to spring and summer cultivation date of some kind of dwarf local beans with red and red veins on the seeds. The 30 selected local beans in Guilan, with the most pathogenic strain of <em>S. rolfsii</em>, were subjected to artificial infection in the greenhouse. Disease Severity Index (DSI) and morphological traits associated with the reaction to the fungus were measured. Eight linked SCAR markers with resistance to bean fungal disease were also used for additional evaluation. Expression changes of the three defense genes including of chitinase (<em>Chiti</em>), chalcone isomeras (<em>ChI</em>), and phenylalanine ammonia lyase (<em>PAL</em>) were analyzed using Real -time PCR in selected lines from each of the resistant, tolerant and sensitive groups, with intervals. They were evaluated at 2, 4 and 6 days after artificial infection with <em>S. rolfsii</em> fungus. Statistical analysis and screening of genotypes using greenhouse data and SCAR markers led to the separation of genotypes and the identification of one resistant, 21 tolerant and semi-susceptible and 8 fully sensitive genotypes. The results showed that the <em>Chiti</em> gene had a similar trend with a gradual increase in expression over the time in resistant and tolerant lines, although the rate of expression in resistant was higher than tolerances. Although the expression of <em>ChI</em> and <em>PAL</em> genes was increasing in resistant genotypes, the expression changes over the time were not the same as the <em>Chiti</em> gene trend. Therefore, the <em>Chiti</em> gene may be a major factor in the resistance of <em>S. rolfsii</em> fungi to local beans in Guilan. لوبیای محلی گیلان, اسکلروتیوم رولفسی, کیتیناز, چالکون ایزومراز, فنیل آلانین آمونیا لیاز Chalcone isomerase, Chitinase, Guilan local bean, Phenylalanine ammonia-lyase, Sclerotium rolfsii 149 160 http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-207-1&slc_lang=fa&sid=1 Asa Ebrahimi آسا ابراهیمی dr.asaebrahimi@gmail.com 10031947532846005094 10031947532846005094 Yes Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran واحد علوم و تحقیقات دانشگاه آزاد اسلامی تهران Mehran Gholami مهران غلامی mehrangholami@yahoo.com 10031947532846005095 10031947532846005095 No Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran واحد علوم و تحقیقات دانشگاه آزاد اسلامی تهران Javad Mozafari جواد مظفری jmozafar@yahoo.com 10031947532846005096 10031947532846005096 No Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Tehran سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران Mohammad Reza Bihamta محمدرضا بی همتا mrghanad@ut.ac.ir 10031947532846005097 10031947532846005097 No Faculty of Agriculture and Natural Resources, University of Tehran, Karaj, Iran پردیس کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه تهران، کرج، ایران Mahdi Rahaie مهدی رهایی mrahaie@ut.ac.ir 10031947532846005098 10031947532846005098 No Faculty of New sciences and Technologies, University of Tehran, Tehran, Iran گروه مهندسی علوم زیستی، دانشکده علوم و فنون نوین، دانشگاه تهران، تهران، ایران