fa توسعه و بهینه سازی تکنیک مقرون به صرفه Tetra-primer ARMS PCR به منظور بررسی جهش g + 6723G> A ژن میوستاتین در گوسفند قره گل ژنتیک جانوری Subject 02 پژوهشي کوتاه Research <h1 dir="RTL" style="text-align:justify"></h1> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><span style="font-family:Tahoma;"><span style="font-size:9pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt">میوستاتین که فاکتور رشد و تمایز 8 (</span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt">GDF8</span><span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt">) نیز نامیده می‌شود به‌عنوان یک تنظیم کننده منفی رشد و توسعه عضلات عمل می‌نماید. بنابراین نقش آن در رشد حیوانات و تولید گوشت حائز اهمیت است. مطالعات عملکردی نشان داده است که یک چندشکلی تک نوکلئوتیدی در ناحیه </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt">3&#39;UTR</span><span style="font-size:10.0pt"> این ژن سبب حذف نقش مهاری میوستاتین و در نهایت بروز فنوتیپ ماهیچه مضاعف در گوسفند می‌شود. روش </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt">tetra primer ARMS PCR</span><span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt"> یک روش آسان، سریع، قابل اعتماد و ارزان برای شناسایی چندشکلی تک نوکلئوتیدی می&shy;باشد. مطالعه حاضر با هدف شناسایی جهش تک نوکلئوتیدی ژن میوستاتین (</span>g + 6723G> A<span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt">) با روش </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt">tetra primer ARMS PCR</span> <span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt">در 86 رأس گوسفند قره‌گل انجام شد. بهینه‌سازی واکنش زنجیره‌ای پلیمراز با استفاده از 3 نمونه شاهد شامل هموزیگوت وحشی، هتروزیگوت و هموزیگوت جهش یافته گوسفند نژاد شاروله صورت گرفت. تمامی نمونه‌های قره گل مورد بررسی دارای آلل </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt">G</span><span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt"> برای چندشکلی تک نوکلئوتیدی ذکر شده بودند و آلل جهش یافته </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt">A</span><span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt"> مشاهده نشد، بنابراین فراوانی آلل جهش یافته (</span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt">A</span><span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt">) و آلل وحشی (</span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt">G</span><span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt">) به‌ترتیب صفر و 100 درصد می&shy;باشد. به‌منظور ارزیابی دقت تکنیک</span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt">tetra primer ARMS PCR</span><span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt"> در این جایگاه، تمامی افراد آزمایش شده با روش </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt">PCR-RFLP</span><span style="font-size:10.0pt"> نیز تعیین ژنوتیپ شدند. نتایج حاصل، حاکی از تطابق دو روش با یکدیگر می‌باشد و از این رو می‌توان در جهت تعیین ژنوتیپ از روش </span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt">Tetra Primer ARMS PCR</span><span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt"> به‌عنوان روشی مقرون به صرفه استفاده نمود</span>.<span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt"><span style="font-family:"B Zar""></span></span></span></span></span></span></p> <p></p> <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:11pt"><span style="line-height:115%"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><span style="font-size:12.0pt"><span style="line-height:115%"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Myostatin, also called growth and differentiation factor 8 (GDF8), acts as a negative regulator of muscle growth and development; Therefore, its role in animal growth and meat production is very important. Functional studies showed that a single nucleotide polymorphism in the 3&#39;UTR region of this gene causes the elimination of its growth inhibitory role and finally the occurrence of double - muscled sheep. The tetra primer ARMS PCR method is an easy, fast, reliable and cost-effective method for the detection of nucleotide polymorphism. The present study was conducted with the aim of identifying single nucleotide polymorphism of myostatin gene (g+6723G>A) using tetra primer ARMS PCR technique in 86 Karakul sheep. Polymerase chain reaction was optimized using 3 control samples including 1 homozygous wild-type, 1 heterozygous and 1 homozygous mutant genotype of sharole breed sheep. All the studied Karakul sheep had the G allele, and the mutant type allele (A allele) was not observed, so the frequencies of the mutant type (A) and the wild type (G) alleles were 0 and 100%, respectively. To evaluate the accuracy of tetra primer ARMS PCR technique in this locus, all tested samples were also genotyped by PCR-RFLP method. The results indicated that two methods are the same as therefore using Tetra Primer ARMS PCR method been as economical to genotyping </span></span></span></span></span></span></div> tetra primer ARMS PCR , میوستاتین , ماهیچه مضاعف , گوسفند قره گل tetra primer ARMS PCR , Myostatin , double – muscled , Karakul sheep 339 346 http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-354-2&slc_lang=fa&sid=1 Davoud Ali Saghi داودعلی ساقی davoudali@yahoo.com 10031947532846007844 10031947532846007844 Yes Department of Animal Science, Khorasan Razavi Agricultural and Natural Resources Research and Education Center مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی خراسان رضوی leila Simaei Soltani لیلی سیمایی سلطانی simaei_leila@yahoo.com 10031947532846007842 10031947532846007842 No Ferdowsi university دانشگاه فردوسی مشهد Faeze Gharaei Kasmaei فائزه قارائی کسمائی gharaeikf981@mums.ac.ir 10031947532846007843 10031947532846007843 No Mashhad university of Medical Science دانشگاه علوم پزشکی مشهد