fa بررسی اثر سدیم الژینات به‌عنوان ادجوانت طبیعی جایگزین بر ایمنی‌زایی واکسن پروتئین نوترکیب RBD-FC تولید شده توسط مخمر پیکیا پاستوریس و بررسی دینامیک مولکولی ژنتیک ریزسازواره Subject 04 پژوهشی کامل Applicable <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:Tahoma;"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed">RBD<span lang="AR-SA"> نقش عمده‌ای در ایجاد عفونت </span>SARS-COV-2<span lang="AR-SA"> ایفا می‌کند، زیرا ورود ویروس به سلول میزبان با اتصال </span>RBD<span lang="AR-SA"> به گیرنده‌ی انزیم مبدل انژیوتانسین ₂(</span>ACE2<span lang="AR-SA">) اتفاق می‌افتد. </span>RBD<span lang="AR-SA"> همچنین یک کاندید ایمنی مهم در توسعه‌ی واکسن‌هایی با زیرواحد پروتئین است. در این مطالعه بیان </span>RBD<span lang="AR-SA"> نوترکیب در مخمر پیکیا پاستوریس به راحتی و با هزینه‌ی کم انجام شد. </span>RBD<span lang="AR-SA"> نوترکیب و ادجوانت‌هایی مانند سدیم الژینات، الوم و ترکیب این دو در مدل موشی در افزایش سطح آنتی بادی‌های خنثی‌کننده و افزایش پایداری واکسن مورد ازمایش قرار گرفتند. نتایج نشان داد که استفاده از یک سیستم کمکی طبیعی جایگزین به‌جای ادجوانت الوم باعث افزایش ایمنی‌زایی آنتی‌ژن </span>RBD<span lang="AR-SA"> و پایداری آن می‌شود، به‌طوری که </span>RBD<span lang="AR-SA"> فرموله شده با سدیم الژینات به تنهایی و </span>RBD<span lang="AR-SA"> فرموله شده با سدیم الژینات و الوم، تیتر آنتی بادی و پایداری بالاتری نسبت به </span>RBD<span lang="AR-SA"> فرموله شده با الوم به تنهایی نشان دادند. افزایش ایمنی‌زایی آنتی ژن </span>RBD<span lang="AR-SA"> با فرمول </span>RBD:SA:AL<span lang="AR-SA"> و </span>RBD:SA توسط سنجش‌های سرولوژیکی نظیر الایزای مستقیم و تست خنثی‌سازی ویروس جایگزین (sVNT<span lang="AR-SA">) تعیین شد. سطوح بالای </span>IgG<span lang="AR-SA"> و آنتی بادی‌های خنثی‌کننده در سرم موش‌هایی که با فرمولاسیون </span>RBD:SA:AL واکسینه شده بودند نشان داده شد. در مجموع، نتایج ما نشان داد که سدیم الژینات به‌عنوان یک ادجوانت طبیعی مؤثر در مقایسه با ادجوانت الوم است. علاوه بر این، با توجه به نتایج به‌دست آمده، ترکیب سدیم الژینات و الوم مؤثرتر از سدیم الژینات به تنهایی است. به‌منظور تجسم ساختار واکسن RBD-FC<span lang="AR-SA">، شبیه‌سازی دینامیک مولکولی برای </span>RBD-FC با گلیکان و بدون گلیکان انجام شد .تجزیه و تحلیل ریشه‌ی میانگین انحراف مربع (RMSD<span lang="AR-SA">)، شعاع چرخش (</span>RG<span lang="AR-SA">) و ریشه میانگین نوسانات مربع (</span>RMSF<span lang="AR-SA">) نشان داد که سازه دارای فولدینگ پایدار و ساختار مناسب به‌دلیل استفاده ازلینکر است.</span></span></span></span></span></p> <p></p> <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><span style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">RBD plays a major role in causing SARS-COV-2 infection, because the entry of the virus into the host cell occurs by binding RBD to the receptor of angiotansin-converting enzyme 2(ACE2). RBD is also an important immunogenic candidate in the development of protein subunit vaccines. In this study, expression of recombinant RBD in Pichia pink yeast was done easily and at low cost. Recombinant RBD and adjuvants such as sodium alginate, alum and the combination of the two were tested in a mouse model in increasing the level of neutralizing antibodies and increase the stability of the vaccine. The results showed that the use of an alternative natural adjuvant system instead of alum adjuvant increases the immunogenicity of RBD antigen and its stability, so that RBD formulated with sodium alginate alone and RBD formulated with sodium alginate and alum showed higher antibody titer and stability compared to RBD formulated with alum alone. The increase in immunogenicity of RBD antigen with RBD:SA:AL formulation was determined by serological assays that included direct ELYSA and surrogate Virus Neutralization Test (sVNT). High levels of IgGs and neutralizing antibodies were shown in serum of mice immunized with the RBD:SA:AL formulation. Collectively, our results showed that sodium alginate is as an effective natural adjuvant compare with the alum adjuvant. In ,addition, according to the obtained results, the combination of sodium alginate and Alum is more effective than sodium alginate alone .In order to, visualize, RBD-FC vaccine structure, molecular dynamics simulation was done for RBD-FC with glycan and without glycan modification. The analysis of root mean square deviation (RMSD), radius of gyration (RG), and root mean square fluctuation (RMSF) showed that the construct has stable fold and suitable conformation due to the used linker.</span></span></span></span></span></span></div> دامنه اتصال گیرنده , سدیم الژینات , ادجوانت طبیعی , تست خنثی سازی ویروس جانشین Natural adjuvant, Receptor binding domain, Sodium alginate, Surrogate Virus Neutralization Test 11 24 http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-427-1&slc_lang=fa&sid=1 Mahboobeh Dehghan محبوبه دهقان 10031947532846008151 10031947532846008151 No Shahid beheshti university دانشگاه شهید بهشتی Masoud Tohidfar مسعود توحیدفر m_tohidfar@ sbu.ac.ir 10031947532846008152 10031947532846008152 Yes Shahid beheshti university دانشگاه شهید بهشتی Seyed omid ranaei Siadat سید امید رعنائی سیادت 10031947532846008153 10031947532846008153 No Shahid beheshti university دانشگاه شهید بهشتی Hossein Askari حسین عسکری h_askari@sbu.ac.ir 10031947532846008154 10031947532846008154 No Shahid beheshti university دانشگاه شهید بهشتی Fataneh Fatemi فتانه فاطمی 10031947532846008155 10031947532846008155 No Shahid beheshti university دانشگاه شهید بهشتی Yahya Sefidbakht یحیی سفیدبخت 10031947532846008156 10031947532846008156 No Shahid beheshti university دانشگاه شهید بهشتی