fa همسانه‌سازی و بیان توالی کد کننده ABRaAدر ﺑﺎﮐﺘﺮی اﺷﺮﺷﯿﺎﮐﻠﯽ ژنتیک گیاهی Subject 01 پژوهشی کامل Applicable <h1 dir="RTL" style="text-align: justify;"><span style="font-family:tahoma;"><span style="font-size:14px;">ابرین یک پروتئین گیاهی سمی از خانواده پروتئین&shy;های بازدارنده&shy;ی ریبوزومی و با ماهیت گلیکوپروتئینی است. این پروتئین شامل دو زنجیره متفاوت <span dir="LTR">A</span> و<span dir="LTR">B </span>&nbsp;است، زنجیره <span dir="LTR">A</span> با وزن 30 کیلو دالتون و با فعالیت ان- گلیکوزیدازی <span dir="LTR">rRNA</span> و زنجیره <span dir="LTR">B</span> با وزن حدود 35 کیلو دالتون و با خاصیت لکتینی که نقش آن تسهیل جذب زنجیره <span dir="LTR">A</span> به داخل سلول میزبان است. در این مطالعه، جداسازی توالی <span dir="LTR">DNA</span> &nbsp;کدکننده زنجیره <span dir="LTR">A</span> ابرین از گیاه<em><span dir="LTR">Abrus precatorius</span></em> &nbsp;با استفاده از تکنیک<span dir="LTR">PCR </span>&nbsp;انجام و در تی وکتور همسانه‌سازی شد. توالی حاصل به‌طول <span dir="LTR">bp</span> 753 به‌عنوان اولین توالی ژنومی زنجیره <span dir="LTR">A</span> ابرین با شماره دسترسی <span dir="LTR"><span style="color:black;">MF573784</span></span> <span style="color:black;">در پایگاه </span><span dir="LTR">GenBank</span> <span dir="LTR"><span style="color:black;">NCBI</span></span><span style="color:black;"> ثبت شد.</span> در ادامه ساختار مولکولی و ویژگی&shy;های بیوشیمیایی آن مورد بررسی قرار گرفت<span dir="LTR">.</span> بررسی ساختارهای دوم و سوم توالی پروتئینی <span dir="LTR">ABRaA</span> با وزن مولکولی 07/28 کیلو دالتون، نشان داد که این پروتئین از نظر ساختاری مشابه با توالی پروتئین&shy;های بازدارنده&shy;ی ریبوزومی نوع <span dir="LTR">II</span> گیاهی می&shy;باشد. بیان پروتئین نوترکیب در سویه (<span dir="LTR">DE3</span>) <span dir="LTR">BL21</span> انجام و صحت آن با استفاده از آزمون لکه‌گذاری وسترن بلات تائید شد.</span></span></h1> Abrin is a plant-derived glycoprotein toxin composed of two polypeptide chains, A chain and B chain. The A-chain (molecular weight 30 kDa) as a <em>N</em>-glycosidase is able to catalyzes the deadenylation of the <em>28S</em> rRNA and thereby inactivate ribosomes.&nbsp; On the other hand, B-chain (molecular weight 35 kDa) is responsible for binding to the target cell and internalization of A-chain. In this study, an abrin A-chain (ABRaA) DNA was isolated from <em>Abrus precatorius</em> by PCR technique and then cloned into a T-vector. This isolated sequence with 753 bp in length was registered to NCBI GenBank with the accession number MF573784, as the first report of A chain abrin DNA. In continue molecular structures and biochemicalcharacteristics of ABRaA were analyzed. &nbsp;The secondary and three dimensional analysis of the polypeptide structure with 28.07 kDa indicated that ABRaA is similar to the&nbsp;RIP-II&nbsp;family of&nbsp;plant&nbsp;proteins. The bacterial expression of ABRaA carried out in &nbsp;&nbsp;BL21 (DE3) strain and subsequently confirmed by Western blot.&nbsp; ابرین پروتئین نوترکیب همسانه سازی وسترن بلات Abrin, cloning, recombinant protein, Western blot 215 223 http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-1-32&slc_lang=fa&sid=1 F Rafiei فریبا رفیعی 1003194753284600258 1003194753284600258 No پردیس کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه تهران، کرج AA Shah Nejat Boushehri علی‌اکبر شاه‌نجات بوشهری 1003194753284600259 1003194753284600259 No پردیس کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه تهران، کرج H Alizadeh هوشنگ علیزاده halizade@ut.ac.ir 1003194753284600260 1003194753284600260 Yes پردیس کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه تهران، کرج