Shamsini Ghiasvand T, Fabriki-Ourang S, Mafakheri S. Isolation and expression study of BBE encoding gene involved in sanguinarin biosynthesis pathway in greater celandine under drought stress . MGj 2018; 13 (3) :343-352
URL:
http://mg.genetics.ir/article-1-71-fa.html
شمسینی غیاثوند طیبه، فابریکی اورنگ صدیقه، مفاخری سودابه. جداسازی و بررسی بیان ژن کدکننده BBE دخیل در مسیر بیوسنتز سنگوئینارین تحت تنش خشکی در مامیران کبیر. فصلنامه علمی ژنتیک نوین. 1397; 13 (3) :343-352
URL: http://mg.genetics.ir/article-1-71-fa.html
گروه ژنتیک و بهنژادی گیاهی، دانشگاه بینالمللی امام خمینی (ره)، قزوین، ایران
چکیده: (2282 مشاهده)
بخشهای مختلف گیاه دارویی مامیران کبیر (Chelidonium majus L.) حاوی ترکیبات متعدد آلکالوئیدی مهم مانند چلیدونین، کلریترین، سنگوئینارین- بربرین است. سنگوئینارین یک بنزوفنانتریدین چهار عضوی میباشد که بهطور گسترده در گیاهان خانواده خشخاش، فوماریاسه و سدابیان وجود دارد. این آلکالوئید بیولوژیک فعال دارای طیف گستردهای از خواص دارویی بالقوه مفید مانند ضد میکروبی، ضد التهابی و خاصیت ضدتوموری میباشد. اولین مرحله در مسیر بیوسنتز آلکالوئید سنگوئینارین مستلزم تبدیل اس- رتیکولین به اس- اسکولرین میباشد که این واکنش مهم بهوسیله آنزیم کلیدی بربرین بریج که توسط ژن BBE کد میشود، صورت میگیرد. بهمنظور تهیه مواد گیاهی برای جداسازی ژن و نیز بررسی میزان بیان ژن BBE (Berberine Beridge Enzyme) در چهار سطح تنش خشکی شدید، متوسط، ضعیف و عدم تنش (بهترتیب با 40، 55، 70 و 100 درصد ظرفیت زراعی) در سه اندام ریشه، ساقه و برگ، آزمایشی بهصورت فاکتوریل در قالب طرح پایه کاملا تصادفی با سه تکرار اجرا شد. جهت جداسازی cDNA کدکننده آنزیم BBE استخراج RNA از بافت ریشه و برای بررسی بیان ژن مذکور، استخراج RNA از ریشه، ساقه و برگ انجام شد.cDNA کدکننده آنزیم BBE از بافت ریشه با طول تقریبی 1500 جفتباز جداسازی و با موفقیت در پلاسمید PTG19-T درج و در سلولهای مستعد شده E. Coli همسانهسازی شد. نتایج توالییابی نشان داد که ژن جداسازی شده با طول 1441 جفتباز، زنجیر پپتیدی به طول 483 اسیدآمینه را کد میکند. زنجیر پپتیدی BBE حاصل، دارای موتیف NX(S/T) بهعنوان جایگاههای گلیکوزیلاسیون،flavin binding domain (برای اتصال هیستیدین فلاوینه شده)، موتیف اسیدآمینهای SGGH و دنباله Glu که نقش کاتالیتیکی مهمی در تشکیل پل بربرین در آنزیمهای فلاووپروتئینی دارد، بود. بر اساس نتایج مقایسه میانگین، بیشترین و کمترین میزان بیان این ژن بهترتیب در بافت ریشه تحت خشکی ضعیف (FC=70%) و در برگ و ساقه در شرایط عدم تنش (FC=100%) حاصل شد. در جمعبندی کلی میتوان نتیجه گرفت که اعمال تنش خشکی ضعیف، سبب افزایش بیان ژن BBE میشود و شاید از این طریق بتوان به تولید سنگوئینارین بیشتری در این گیاه دست یافت.
نوع مطالعه:
پژوهشی کامل |
موضوع مقاله:
ژنتیک گیاهی دریافت: 1396/10/30 | پذیرش: 1397/7/15 | انتشار: 1398/7/10